Humane rekombinante Antikörper gegen CEA und NKG2D in mono- und bispezifischen Formaten

Die Verwendung monoklonaler Antikörper stellt eine wichtige und erfolgreiche Option für die Diagnostik und Behandlung von Krebserkrankungen dar. Die Entwicklung neuer gentechnologischer Verfahren erlaubte Anfang der 1990er Jahre die Generierung genetisch vollständig humaner Antikörper. Neue Screening- und Engineering-Technologien ermöglichten darüber hinaus die Schaffung einer neuen Antikörpergeneration in einer Vielfalt an Formaten mit verbesserten Eigenschaften bei gleichzeitig reduzierter Immunogenität. Einen vielversprechenden Ansatz bilden die Generierung und der Einsatz bispezifischer Antikörper, welche zwei verschiedene Tumor-assoziierte Antigene binden können oder Antigene auf der Oberfläche von Tumorzellen und Effektorzellen erkennen. 
Ziel dieser Arbeit war die Charakterisierung von humanen monoklonalen Antikörpern gegen das Tumor-assoziierte Antigen CEA und das Effektorzellantigen NKG2D in verschiedenen mono- und bispezifischen Formaten hinsichtlich der Antigenbindung, des Aggregationsverhaltens und ihrer Funktionalität. 
Ausgehend von scFv-Fragmenten, die mittels Phagendisplay und Panning aus einer Antikörpergenbibliothek selektiert wurden, konnten auf Grundlage eines Kassetten-basierten Vektorsystems erfolgreich Antikörper in den Formaten scFv-Fc, IgG, scFv-Fc-scFv und IgG-scFv z.T. mit ADCC-optimiertem Fc-Teil generiert und produziert werden. Die Antikörper wiesen in den verschiedenen Formaten eine spezifische Antigenbindung auf. Darüber hinaus konnte bei einem der CEA-spezifischen Antikörper der Einfluss von Aviditätseffekten auf die Antigenbindung nachgewiesen werden. Die Aggregationsneigung variierte in Abhängigkeit vom Format stark. Die geringste Aggregationsneigung wiesen Antikörper im IgG-Format auf, wohingegen die Tendenz zur Bildung von Dimeren am stärksten im scFv-Fc-scFv-Format ausgeprägt war. Im Zytotoxizitätsassay konnte die Funktionalität der verschiedenen mono- und bispezifischen Konstrukte sowie eine Verstärkung der Zelllyse durch den ADCC-optimierten Fc-Teil nachgewiesen werden. 
Die Ergebnisse dieser Arbeit deuten auf eine grundlegende Eignung der analysierten mono- und bispezifischen Antikörper für die Weiterentwicklung im Zusammenhang mit therapeutischen Zwecken hin.