Analytik von proteinogenen und niedermolekularen Arzneistoffen unter Verwendung von Hochleistungsflüssigchromatographie, Hochauflösender Kontinuumstrahler Atomabsorptionsspektrometrie und weiteren Techniken

In dieser Arbeit wurden verschiedene Einflussfaktoren auf die Ergebnisse von analytischen Untersuchungen von Arzneistoffen betrachtet. Die Richtigkeit analytischer Verfahren spielt eine zentrale Rolle für die Sicherheit von Arzneimitteln. Die Probenvorbereitung im Rahmen der Analytik wurde für diese Arbeit kritisch betrachtet und hinterfragt. Das Ausmaß der Beeinflussung der Probe hängt von vielerlei Faktoren wie dem pH-Wert der Lösung, der Pufferkonzentration, der Temperatur bzw. Einfriergeschwindigkeit, aber auch von verwendeten (probenberührenden) Materialien, sowie maßgeblich von den Eigenschaften des Analyten selbst ab. Flüssige Proben, die Proteine ohne eine Zellmatrix enthalten, sollten im Gefrierfach bei -8 °C bis -20 °C gelagert werden. Das standardmäßig eingesetzte Sterilfiltrieren von Probenlösungen vor der Messung in der HPLC ist ein sinnvoller Schritt, um Säule und Gerät vor ungelösten Probenbestandteilen und Mikroorganismen bzw. Pilzsporen zu schützen, kann aber auch zu messbaren Adsorptionseffekten führen. Als unkritisch für Proteine erweist sich die Anwendung von Ultraschall. Hierdurch wird das Lösen von Proben beschleunigt und die Lösung wird von gelösten Gasen befreit. Versuche zur Proteinadsorption an verschiedenen Bauteilen und Materialien einer HPLC-Anlage und Größenausschlusssäulen mittels UV-Detektion und hochauflösender Atomspektrometrie zeigten den Einfluss des chromatographischen Vorganges an sich auf proteinhaltige Proben. Im Rahmen dieser Arbeit wurde außerdem die Untersuchung einer halbfesten Zubereitung durchgeführt, welche die Wirkstoffe Metronidazol und Erythromycin enthielt. Als besonders kritisch ist hier das Kristallwachstum der Wirkstoffe zu sehen. Die flüssigchromatographische Untersuchung nach durchgeführter flüssig-flüssig-Extraktion gab Aufschluss über die hydrolytische Stabilität und den Gesamtgehalt der Wirkstoffe, sowie auftauchender Abbauprodukte. Nach 8 Wochen zeigte sich in allen Zubereitungen mehr als 82% der eingesetzten Ausgangsmenge an Metronidazol, während der Erythromycingehalt in einer der untersuchten Zubereitungen auf 55% absank. Zur Analytik wurde ein Methodentransfer von einer partikulären Trennsäule auf eine monolithische stationäre Phase durchgeführt. Durch die Verwendung eines Monolithen der zweiten Generation (HR-Monolith) konnte in einem nächsten Schritt die ursprüngliche Methode ohne erweiterte Adaption übernommen und dann durch einen Flussratengradienten ohne weitere Anpassungen verkürzt werden.