Neue Antikörperselektionsstrategien

In Zeiten der aufstrebenden personalisierten Medizin ist die schnelle und zuverlässige Generierung von spezifischen Antikörpern von besonderer Bedeutung - sei es zum Zwecke der Forschung, der Diagnostik oder der Therapie. Auch für die Erforschung der Proteomics, der Gesamtheit aller Proteine eines Organismus, sind spezifische Antikörper unabdingbar. Deren Generierung in-vitro wird seit den 1990er Jahren durch das Screenen von Antikörper-Phagenbibliotheken im sogenannten Panning erfolgreich durchgeführt. Verschiedene Faktoren wie die Antigenproduktion, die Antigenaufreinigung, der Verbrauch großer Mengen Antikörper-Phagenbibliotheken und der große manuelle Aufwand führen allerdings zu einer Limitierung dieser Methode im Hochdurchsatz. Aus diesem Grund müssen neue Antikörperselektionsstrategien für Hochdurchsatzverfahren entwickelt und deren Realisierung systematisch getestet werden. In dieser Arbeit wurde die etablierte Panningmethode mit scFv-Phagenbibliotheken auf immobilisiertem Antigen auf ihr Potential bezüglich der Miniaturisierung analysiert. Zusätzlich wurde die Protein-Microarraytechnologie in der Arbeitsgruppe etabliert und ihre Limitierung für die Anwendung im Panning aufgezeigt. Als unabhängige Technologie wurde eine Kombination aus Antikörper-Phagenbibliotheken und Antigen-Zelloberflächenbibliotheken entwickelt und das Potential für Antigen-Antikörper-Interaktionsstudien diskutiert. Im Rahmen dieser Arbeit konnten so wichtige Vorarbeiten geleistet und Trends erfasst werden, die die Vision eines proteomweiten Antikörperrepertoires in Zukunft ermöglichen können.