Eine innovative Strategie zur Etablierung physiologisch relevanter Säugerzelllinien

Aussagekräftige endotheliale in vitro Testplattformen werden in der Wirkstoffentwicklung für kardiovaskuläre Erkrankungen benötigt. Während solcher Entwicklungsprozesse ist es wichtig, möglichst frühzeitig abzuschätzen, wie sich ein Produkt in Bezug auf Wirksamkeit, Gesundheit und Umwelt auswirkt. Es besteht eine immer stärkere Notwendigkeit zellbasierte in vitro Testverfahren als Alternative zu Tierversuchen einzusetzen. Zudem sind Endothelzellen in der Forschung, der regenerativen Medizin und Zelltherapie von hohem Interesse. Den Engpass stellt die Versorgung mit genügend Zellmaterial dar, dass die physiologischen Eigenschaften des nativen Zelltyps aufweist, um aussagekräftige reproduzierbare Erkenntnisse zu generieren, die möglichst nahe der in vivo Situation sind. Das hier vorgestellte Immortalisierungsverfahren ermöglicht die Etablierung einer neuen Kategorie von Zelllinien, die zum einen die Proliferation von klassischen Linien aufweisen, zum anderen den funktionalen Phänotyp des nativen Zelltyps konservieren. Der Hypothese folgend, dass man zur Etablierung einer funktionalen Zelllinie eine zelltypspezifische Kombination an Immortalisierungsgenen benötigt, wurde in dieser Arbeit eine innovative Screeningmethode entwickelt, die zum einen die Immortalisierung ermöglichen und zum anderen den physiologisch relevanten Phänotyp konservieren. Zur Selektion dieser Genkombinationen, wurden die generierten Endothelzelllinien einer Charakterisierung unterzogen und ihre Expression endothel-spezifischer Marker und Funktionen im Vergleich zu dem Verhalten der entsprechenden primären Zellen evaluiert. Im Vergleich zu etablierten Immortalisierungsansätzen, weisen die resultierenden Zelllinien eine physiologische Funktionalität und Phänotyp auf, ermöglichen eine unkomplizierte Handhabung und generieren valide Ergebnisse.