Generierung und Charakterisierung von rekombinanten Antikörperfragmenten gegen das Venezuelanische und Westliche Pferdeenzephalitis-Virus

Das Venzuelanische und das Westliche Pferdeenzephalitis-Virus (VEEV, WEEV) gehören zur Gattung der Alphaviren. Einige Subtypen dieser Viren sind humanpathogen und zählen als enzephalizide Viren zu den bioterroristischen Agenzien der Kategorie B. Bisher existieren nur wenige monoklonale Antikörper, die nur im Bereich der Diagnostik Verwendung finden. Die Behandlung bei Infektionen erfolgt nur unterstützend, eine antivirale Therapie steht bisher nicht zur Verfügung. Ziel dieser Arbeit war die Generierung von Antikörpergenbibliotheken aus dem Knochenmark immunisierter Makaken (Macaca fascicularis) und die Isolierung virusspezifischer Antikörper mittels Phagen-Display-Technologie. Es konnten spezifisch bindende scFv-Fragmente aus den Immunbibliotheken isoliert werden, welche in das scFv-Fc Antikörperformat überführt und charakterisiert wurden. Die Antikörper wurden erfolgreich als Fänger- und Detektionsantikörper in ELISA- und immunhistochemischen Experimenten eingesetzt. Der einzige gegen das VEE-Virus isolierte Antikörper, ToR67-3B4, wurde im Folgenden auf neutralisierende Eigenschaften untersucht. Dabei wurde in vitro eine Verhinderung der Infektion für einige Virustypen nachgewiesen. Zusätzlich dazu konnten in vivo Mäuse vor der Infektion mit den VEE-Subtypen TrD, Mena II, Fe37c und BeAn8 geschützt werden, wenn eine Behandlung mit dem scFv-Fc-Antikörper ToR67-3B4 6 Stunden nach Infektion durchgeführt wurde. Damit wurde eine Protektion durch den Antikörper nachgewiesen, welcher die Mäuse somit effektiv vor einer Infektion schützt. In dieser Arbeit wurden erstmals virusspezifische Antikörper aus einer Immunantikörpergenbibliothek nach Selektion auf aktiven Viruspartikeln isoliert. Diese Antikörper könnten zur schnellen Identifikation und Detektion von VEEV und WEEV eingesetzt werden. Für den VEEV-spezifischen Antikörper ToR67-3B4 besteht außerdem die Möglichkeit zum Einsatz in der Therapie, da eine Protektion vor Infektionen in vivo nachgewiesen werden konnte.