Molekulare Interaktion des Legionella Mip-Proteins mit Collagen IV und Analyse infektionsspezifischer Wirtsfaktoren mit Hilfe von Dictyostelium discoideum

Legionella pneumophila ist der Hauptverursacher der Legionärskrankheit. Das Mip-Protein (macrophage infectivity potentiator) von L. pneumophila ist eine Peptidyl-prolyl-cis/trans-Isomerase (PPIase), die an Collagen IV bindet und ein wichtiger Virulenzfaktor, der an humanes Collagen IV (Col IV) bindet. In dieser Arbeit konnte eine spezifische Mip-Bindungssequenz in Col IV identifiziert werden. Die Interaktion zwischen Mip und der putativen Bindungssequenz konnte mit Hilfe eines synthetisch hergestellten Peptids (P290) in Kopräzipitatonsexperimenten bestätigt werden. P290 konnte zudem die PPIase-Aktivität in einem auf 50 % reduzieren und die Bindung von Mip an immobilisiertes Col IV unterbinden. Außerdem verringerte P290 in die bakterielle Transmigration über eine Epithelbarriere in vitro. Die inhibitorische Eigenschaft von P290 weist auf dessen Potential als eine Grundlage für alternative Therapeutika hin, die gegen das extrazelluläre Virulenzpotential von L. pneumophila gerichtet sind. Die intrazelluläre Legionella?Infektion wurde mit Hilfe des etablierten Modellorganismus’ Dictyostelium discoideum untersucht. Die Verwendung von Deletionsmutanten hat der Autophagie und dem PI-Metabolismus in Dictyostelium Funktionen zugewiesen, die auf humane Makrophagen übertragen werden können. Die Untersuchung der traskriptionellen Antwort von D. discoideum auf Mycobacterium marinum mit Hilfe eines Micro-Arrays ergab, dass die meisten transkriptionellen Unterschiede zwischen infizierten und nicht infizierten Dictyostelien 24 h nach Infektionsbeginn auftauchen. Vergleiche von Infektionen mit dem Wildtyp (R93) und dessen pmiA negativen Mutante ermöglichten die Identifizierung von Genen, die spezifisch für virulente M. marinum waren. infektionsrelevanten Wirtsfaktoren.