Targeted RNase : Humane Antikörper-RNase-Fusionen zur Bekämpfung von CD30+ Lymphomen

Die steigende Bedeutung der antikörperbasierten Krebstherapie spiegelt sich in der stark gestiegenen Anzahl in klinischen Studien befindlicher mAk wider. Zusätzlich stehen insbesondere Antikörperfusionen zur Funktionserweiterung im Mittelpunkt. Ein Forschungsschwerpunkt konzentriert sich auf den Einsatz von RNasen als Fusionspartner der mAk. Das Prinzip der mittels Antikörper zielgerichtet geleiteten RNasen (Targeted RNase, TR), beruht auf der antigenspezifischen Bindung an Oberflächenmarker von Tumoren, die zu rezeptorvermittelter Endozytose befähigt sind. Nach Internalisierung muss eine Translokation ins Zytoplasma erfolgen, um die katalytische Funktion der RNase zur Inhibition des Proteinsyntheseapparates zu ermöglichen. In der Arbeit wurde ein vollständig humanes Antikörper-RNase-Fusionsprotein erzeugt, das gegen den internalisierenden Tumormarker CD30 gerichtet ist. Als Bindungsdomäne der TR-Konstrukte wurden unterschiedliche Antikörperformate untersucht. Bei BIAcore- und FACS-Messungen stellte sich das scFv-Fc-Format mit einer Affinität von 9,8x10-10M gegenüber dem scFv- und IgG-Format als überlegen heraus. Bei der Untersuchung der Auswirkung von der Antikörper-RNase-Fusion auf die RNase Aktivität zeigte sich, dass die C-terminale Fusion der RNase an die Fc-Domäne des CD30-spezifischen scFv-Fc die geringste Beeinträchtigung der RNase Aktivität verursachte. Die humane pankreatische RNase war gegenüber zytoplasmatisch vorhandenen RNasen-Inhibitoren nicht sensitiv und eine Internalisierung des scFv-Fc-RNase-Konstruktes nach Bindung an CD30+ Karpas 299-Zellen wurde nachgewiesen. Das Wachstum dieser CD30+ Zellen mit einer IC50 von 3,3 nM gehemmt. Das erzeugte CD30-scFv-Fc-RNase-Fusionskonstrukt ist das erste vollständig humane TR-Konstrukt, das zur Behandlung von CD30+ Lymphomen dienen könnte. Das Spektrum an behandelbaren Krebserkrankungen kann im Rahmen des TR-Konzepts durch den Austausch des Antikörpers auf weitere internalisierende Tumormarker erweitert werden.