Identifizierung und Charakterisierung von Plasmin(ogen)-Bindungsproteinen von Streptococcus pneumoniae

Das humanpathogene Bakterium Streptococcus pneumoniae interagiert im Infektionsprozess mit verschiedenen Komponenten des Serums und der extrazellulären Matrix. In Bindungsversuchen mit radioaktiv markiertem Plasminogen konnte die Bindung von humanem Plasminogen an Pneumokokken unabhängig vom Serotyp bestätigt werden. Durch aminoterminale Sequenzanalyse wurde die Enolase von Streptococcus pneumoniae als Plasmin- und Plasminogenbindungsprotein identifiziert. Das Enolaseprotein konnte sowohl im Zytoplasma als auch an der bakteriellen Oberfläche nachgewiesen werden. Ergebnisse von Bindungsstudien mit radioaktiv markiertem Enolaseprotein zeigten eine konzentrationsabhängige Bindung der Enolase an die Pneumokokkenoberfläche. Das eno-Gen konnte im Genom von unterschiedlichen Pneumokokken-Serotypen konserviert nachgewiesen werden. Bindungsstudien zur Interaktion zwischen der Enolase mit Lysinanloga und Plasminogenteilfragmenten zeigten, dass die Lysinbindungsstellen der Kringeldomänen 1-3 an der Bindung an die Enolase beteiligt sind. Die carboxyterminalen Lysine der Enolase zeigten in Bindungsstudien nach spezifischer Proteolyse eine Beteiligung an der Plasminogenbindung. Ergebnisse von Oberflächen-Plasmon-Resonanzstudien mit carboxyterminal substituierten und deletierten Enolaseproteinen wiesen auf weitere Bindungsregionen im Enolaseprotein hin. In Spot-Membran-Analysen wurde ein weiteres internes Bindungsmotiv identifiziert und näher untersucht.